產(chǎn)品詳情介紹
來(lái)源：人源
組織來(lái)源：肝臟
生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁
完全培養(yǎng)基：DMEM(Code#FI101)+10%FBS(Code#FS501)+Penicillin-Streptomycin(100×)(Code#FG101)
培養(yǎng)條件：37℃，95%潔凈空氣+5%二氧化碳
細(xì)胞復(fù)蘇：
將細(xì)胞從液氮中取出，迅速置于37℃水浴鍋中，并輕輕晃動(dòng)。待凍存的細(xì)胞融化成只有綠豆大小的冰球時(shí)，迅速移至細(xì)胞工作臺(tái)，將細(xì)胞移入15 ml離心管中，加入預(yù)熱的完全培養(yǎng)基3-6 ml，輕輕混勻，500-800 rpm離心5-10 min，小心地移去上清。使用3-15 ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，再輕輕的混勻細(xì)胞，接種至合適的新培養(yǎng)介質(zhì)中。
細(xì)胞傳代：
以6孔板為例，將細(xì)胞培養(yǎng)基移去，使用無(wú)鈣鎂PBS(Code#FG701)小心地清洗細(xì)胞1-3次，移掉PBS，加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301)，37℃培養(yǎng)箱孵育1-3 min，在倒置顯微鏡下觀察，大部分細(xì)胞變圓且沒(méi)有細(xì)胞或僅有少量細(xì)胞脫落時(shí)，使用3-6 ml完全培養(yǎng)基中止消化，輕輕的混勻細(xì)胞，傳代至合適的新培養(yǎng)介質(zhì)中。如果細(xì)胞狀態(tài)較差，在中止消化后，500-800 rpm離心5-10 min，去除上清，使用合適量的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，再輕輕的混勻細(xì)胞，傳代至合適的新培養(yǎng)介質(zhì)中。
傳代比例：1:3-1:6
傳代間隔：每2-3天傳代一次
凍存培養(yǎng)基：TransStem? Chemically Defined Xeno-free Cell Cryopreservation Medium-Protein Free(Code#MC102)
細(xì)胞凍存：
以6孔板為例，待細(xì)胞匯合度為90%左右、細(xì)胞數(shù)量為1-2×106個(gè)細(xì)胞時(shí)，移去細(xì)胞培養(yǎng)基，使用無(wú)鈣鎂PBS(Code#FG701)小心地清洗細(xì)胞1-3次，移掉PBS，加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301)，37℃培養(yǎng)箱孵育1-3 min，在倒置顯微鏡下觀察，大部分細(xì)胞變圓且沒(méi)有細(xì)胞或僅有少量細(xì)胞脫落時(shí)，使用3-6 ml完全培養(yǎng)基中止消化，輕輕的混勻細(xì)胞，500-800 rpm離心5-10 min，去除上清，使用1 ml凍存培養(yǎng)基輕輕的重懸細(xì)胞，將細(xì)胞移入凍存管中，標(biāo)記并放入4℃預(yù)冷的凍存盒中，置于-80℃，冷凍過(guò)夜。次日取出放于液氮中長(zhǎng)期保存。
